用語集
ATP（エーティーピー）：アデノシン三リン酸
KCl（ケーシーエル）：塩化カリウム
M（モーラー）：mol/L
アクトミオシン：アクチンとミオシンの結合体
緩衝液（かんしょうえき）：濃度が変化してもpHが大きく変化しない溶液
コントロール：対照群
プランジャー：スライド時の位置決め用の部品
字幕
1
00:00:05,605 --> 00:00:10,243
こちらは 2本の試験管を用意します
2
00:00:10,243 --> 00:00:19,886
試験管に「コントロール」と「ATP」の
2つのラベルを貼ります
3
00:00:19,886 --> 00:00:28,128
そこに50ml の遠沈管に取り出した
アクトミオシンの原液を500μl とって
4
00:00:28,128 --> 00:00:32,198
高塩濃度緩衝液を 500μl 加えます
5
00:00:32,198 --> 00:00:37,904
すると 濃度が半分になる溶液が
1ml できます
6
00:00:37,904 --> 00:00:49,883
そこに室温の純水をマイクロピペットで
1ml 加えては試験管を軽く振る
7
00:00:49,883 --> 00:00:53,620
また1ml 加えては軽く振ることを繰り返して
8
00:00:53,620 --> 00:00:56,89
合計5ml 加えます
9
00:00:56,89 --> 00:00:58,291
少しずつ塩濃度を下げていく
10
00:00:58,291 --> 00:01:00,960
一気に5ml 加えるのではなく
11
00:01:00,960 --> 00:01:04,164
1ml 加えては攪拌
1ml 加えては攪拌
12
00:01:04,164 --> 00:01:11,705
そうすると 合計の体積が6ml ですが
13
00:01:11,705 --> 00:01:15,75
KClの濃度は0.1M(モーラー)になります
14
00:01:15,75 --> 00:01:20,814
アクトミオシンは本来
不溶性となる塩濃度となります
15
00:01:20,814 --> 00:01:27,721
その状態で置いておくと
不溶性ですから だんだん底に沈殿してしまいます
16
00:01:27,721 --> 00:01:31,291
(すると) 超沈殿が
観察できなくなりますので
17
00:01:31,291 --> 00:01:39,699
6ml 入れたらすぐ
プリントの3番をやってください
18
00:01:39,699 --> 00:01:43,203
ここでプリントの訂正があります
19
00:01:43,203 --> 00:01:49,843
「コントロール」に純水を30μl
これを60μl にします
20
00:01:49,843 --> 00:01:56,249
それから「ATP添加」に
0.2M ATPを30μl とありますけど
21
00:01:56,249 --> 00:02:01,721
これが0.1M ATPを60μl
に変更します
22
00:02:01,721 --> 00:02:06,593
60μl といったら 1滴よりは多いですが
結構少ない量です
23
00:02:06,593 --> 00:02:10,730
なので 試験管の上の方から入れると
24
00:02:10,730 --> 00:02:15,168
試験管の内壁にくっついて
溶液の中に入らないことがあります
25
00:02:15,168 --> 00:02:17,470
確実に入れるために
26
00:02:17,470 --> 00:02:19,105
(純水や)ATPの溶液は
27
00:02:19,105 --> 00:02:25,211
チップの先端を液面より中まで入れて
28
00:02:25,211 --> 00:02:28,748
そしてプランジャーを押して 押し出す
29
00:02:28,748 --> 00:02:37,323
入れたら 試験管を強めに振ります
30
00:02:37,323 --> 00:02:40,827
振ったら 試験管立てに置く
31
00:02:40,827 --> 00:02:43,229
そこから先は動かさない
32
00:02:43,229 --> 00:02:46,366
動かさないで
そこから時間を測って
33
00:02:46,366 --> 00:02:53,540
何分後に どちらの試験管にどういう変化が起こったのか
ということを記録してください
34
00:02:53,540 --> 00:02:59,79
試験管内での筋収縮という風に
呼ばれているのですが
35
00:02:59,79 --> 00:03:02,515
不溶化した沈殿ができるのですが
36
00:03:02,515 --> 00:03:07,654
その沈殿が収縮していく
動いていくという現象が見られます
