①
細胞移植用の針を用意する。
②
何も入れずにインジェクターのホルダーに装着する。装着部分にインジェクターのミネラルオイルが入っているのを確認する。
③
インジェクターのノブを時計回りに動かし、ミネラルオイルを針先の方へ入れ、狭窄部の手前で止める。
④
移植用の針を、移植に使うシャーレの一次培養液の中に下ろす。
⑤
ホルダーと移植針の結合部分のネジを右回り(閉まる方向)に回し、移植針の針先を上方に向ける。
⑥
インジェクターのノブを反時計回りに動かして、一次培養液を移植用針の中に吸い込む。
⑦
一次培養液を移植針の中間まで吸い込んで止める。
⑧
未受精卵を選んで移植シャーレに入れ、卵黄部分に移植針を差し込む。
⑨
インジェクターのノブを反時計回りに回し、卵黄を針中(狭窄部分まで)に入れて、内部を卵黄でコートする。
⑩
一次培養液を移植針に出し入れさせて余分な卵黄を洗い出す。未受精卵を取り出す。
⑪
移植シャーレの中に細胞標識された胚(donor)と無標識の胚(host)を入れる。
⑫
標識された胚の胚盤に移植針を差し込む。あまり深く差し込むとYSLを吸い込むことになる。
⑬
インジェクターのノブを反時計回りに回し(少し触る位で良い)、深層細胞(DC)を移植針に吸い込む。狭窄部でDCが止まるくらいが良い。
⑭
針をdonorの胚盤から抜き、hostの胚盤の移植したい部分へ差し込む。
⑮
インジェクターのノブを時計回りに回し(少し触る位で良い)、移植針中のDCをhost胚へゆっくりと入れる。
⑯
移植したキメラ胚は、他の胚と混ざらないように分けておく。